DNase I (Rnase Free) (2u/ul)
شماره گربه: HC4007B
DNase I یک اندونوکلئاز است که می تواند DNA تک یا دو رشته ای را هضم کند.این می تواند پیوندهای فسفودی استر را برای تولید تک و الیگودئوکسی نوکلئوتیدهای حاوی یک گروه 5'-فسفات و یک گروه 3'-OH هیدرولیز کند.محدوده pH کار بهینه DNase I 7-8 است.فعالیت DNase I به Ca بستگی دارد2+و می تواند توسط یون های فلزی دو ظرفیتی مانند CO فعال شود2، منگنز2+، روی2+و غیره در حضور Mg2+، DNase I می تواند به طور تصادفی هر محل از DNA دو رشته ای را جدا کند.در حالی که در حضور من2+، DNase I می تواند DNA دو رشته ای را در همان محل شکاف دهد و انتهاهای صاف یا انتهای چسبناک را با 1-2 نوکلئوتید بیرون زده تشکیل دهد.می توان از آن برای پردازش نمونه های مختلف RNA استفاده کرد.
اجزاء
| نام | 1KU | 5KU |
| DNaseI نوترکیب (بدون RNase) | 500 میکرولیتر | 5×500 میکرولیتر |
| بافر واکنش DNase I (10×) | 1 میلی لیتر | 5 × 1 میلی لیتر |
شرایط نگهداری
این محصول باید به مدت 2 سال در دمای -25 ~ -15 درجه سانتیگراد نگهداری شود.لطفاً از انجماد و ذوب مکرر خودداری کنید.
دستورالعمل ها
برای حذف DNA از نمونه های RNA فقط برای مرجع اعمال می شود.
1. لطفاً از لوله های سانتریفیوژ بدون RNase و نوک پیپت برای تهیه سیستم واکنش زیر استفاده کنید:
| اجزاء | حجم (μL) |
| بافر واکنش DNase I (10×) | 1 |
| DNasel نوترکیب (بدون RNase) | 1 |
| RNA | X |
| ddH بدون RNase2O | تا 10 |
2. شرایط واکنش به شرح زیر است: 37 درجه، پس از 15-30 دقیقه، غلظت نهایی 2.5 میلی مولار محلول EDTA را اضافه کنید و خوب مخلوط کنید، سپس 65 درجه سانتیگراد به مدت 10 دقیقه.الگوی پردازش شده را می توان برای آزمایش های بعدی RT-PCR یا RT-qPCR و غیره استفاده کرد.
یادداشت
1. DNase l به دناتوره شدن فیزیکی حساس است.هنگام مخلوط کردن، لوله آزمایش را به آرامی برگردانید وخوب تکان دهید، به شدت تکان ندهید.
2. آنزیم باید در جعبه یخ یا حمام یخ در هنگام استفاده ذخیره شود و بلافاصله پس از استفاده در دمای -20 درجه سانتیگراد نگهداری شود.
3. این محصول فقط برای استفاده تحقیقاتی است.
4. لطفاً برای ایمنی خود با کت های آزمایشگاهی و دستکش های یکبار مصرف کار کنید.
