Bst 2.0 DNA Polymerase (بدون گلیسرول، چگالی بالا)
Bst DNA پلیمراز V2 از Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I مشتق شده است که دارای فعالیت DNA پلیمراز 5'→3' و فعالیت جایگزینی زنجیره قوی است، اما فعالیت اگزونوکلئاز 5'→3' ندارد.Bst DNA Polymerase V2 برای جابجایی رشته، LAMP تقویت همدما (تقویت همدما با واسطه حلقه) و توالی یابی سریع مناسب است.این Bst DNA پلیمراز V2 قادر به مهار فعالیت DNA پلیمراز در دمای اتاق است، به طوری که می توان آن را عمل کرد و سیستم واکنش را می توان در دمای اتاق فرموله کرد، از تقویت غیر اختصاصی و بهبود کارایی واکنش جلوگیری کرد و این نسخه می تواند لیوفیلیزه شودعلاوه بر این، قادر است فعالیت خود را در دماهای بالا آزاد کند، بنابراین نیاز به یک مرحله فعال سازی جداگانه را از بین می برد.
اجزاء
| جزء | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA پلیمراز V2 (بدون گلیسرول) (32U/μL) | 0.05 میلی لیتر | 0.25 میلی لیتر | 2.5 میلی لیتر |
| بافر 10×HC Bst V2 | 1.5 میلی لیتر | 2×1.5 میلی لیتر | 3×10 میلی لیتر |
| MgSO4 (100 میلی متر) | 1.5 میلی لیتر | 2×1.5 میلی لیتر | 2×10 میلی لیتر |
برنامه های کاربردی
1.تقویت همدما لامپ
2.واکنش جابجایی تک رشته DNA
3.تعیین توالی ژن GC بالا
4.تعیین توالی DNA در سطح نانوگرم.
شرایط نگهداری
حمل و نقل در دمای 0 درجه سانتیگراد و در دمای 25- تا 15 درجه سانتیگراد نگهداری شود.
تعریف واحد
یک واحد به عنوان مقدار آنزیمی است که 25 نانومول dNTP را در مواد نامحلول در اسید در 30 دقیقه در دمای 65 درجه سانتیگراد ترکیب می کند.
واکنش لامپ
| اجزاء | 25 μLسیستم |
| بافر 10×HC Bst V2 | 2.5 میکرولیتر |
| MgSO4 (100 میلی متر) | 1.5 میکرولیتر |
| dNTP (هر کدام 10 میلی‌متر) | 3.5 میکرولیتر |
| SYTO™ 16 سبز (25×)a | 1.0 میکرولیتر |
| مخلوط پرایمرb | 6 میکرولیتر |
| Bst DNA Polymerase V2 (بدون گلیسرول) (32 U/UL) | 0.25 میکرولیتر |
| قالب | × μL |
| ddH2O | تا 25 میکرولیتر |
یادداشت:
1) الف.SYTOTM 16 Green (25×): با توجه به نیازهای تجربی، می توان از رنگ های دیگر به عنوان جایگزین استفاده کرد.
2) ب.مخلوط پرایمر: با مخلوط کردن 20 میکرومولار FIP، 20 میکرومولار BIP، 2.5 میکرومولار F3، 2.5 میکرومولار B3، 5 میکرومولار LF، 5 میکرومولار LB و حجم های دیگر به دست می آید.
واکنش و شرایط
بافر 1 × HC Bst V2، دمای انکوباسیون بین 60 تا 65 درجه سانتی گراد است.
غیر فعال سازی حرارتی
80 درجه سانتیگراد، 20 دقیقه
