اندونوکلئاز محدود BsaI
شرح
آنزیم محدود کننده BsaI یک اندونوکلئاز محدود کننده نوع II است که از پروتئین نوترکیب کد گذاری شده توسط ژن BspQI در باسیلوس اسفاریکوس بیان شده توسط E.coli مشتق شده است.اندونوکلئازهای محدود به طور گسترده در نقشه برداری ژن، شبیه سازی و سایر زمینه ها استفاده می شوند.این آنزیم به سرعت DNA را برای خطیسازی کارآمد ژن قطع میکند. Bsa I، یک اندونوکلئاز محدودکننده محدودکننده IIs، از سویه نوترکیب E. coli که حامل ژن BsaI کلونشده و اصلاحشده از Bacillus stearothermophilus است، مشتق شده است.که دارای ویژگی مشابه با آنزیم های بومی و کاهش فعالیت ستاره هستند.توالی تشخیص و محل برش آن به شرح زیر است:
5'·······GGTCTC(N)·········3'
3'······CCAGAG(NNNNN)·······5'
ساختار شیمیایی
مشخصات محصول
• اندونوکلئاز محدود کننده فعالیت آنزیمی بالایی دارد و واکنش هضم را به سرعت کامل می کند.
• فعالیت اندونوکلئاز غیر اختصاصی کم برای اطمینان از برش دقیق "اسکالپل".
• عدم وجود سیستم BSA، کاهش آلودگی منبع حرارتی.
مشخصات
موارد تست | مشخصات فنی |
فعالیت آنزیمی | 20 U/µL |
خلوص (SDS-PAGE) | ≥95% |
Rnase | هیچ کدام شناسایی نشد |
فعالیت غیر اختصاصی DNase | شناسایی نشد |
فعالیت ستاره | شناسایی نشد |
بستن و برش | پس از هضم، قطعات DNA را می توان بستند.و این قطعات بستن را می توان با بسال دوباره برش داد. |
اندوتوکسین ها (تست LAL) | ≤10 EU/mg |
E.Coli DNA | ≤1 کپی/2U |
کنترل کیفیت
خلوص ≥ 95٪، بدون DNase، فعالیت RNase، باقیمانده DNA میزبان ≤ 100 pg/mg، باقیمانده پروتئین میزبان ≤ -50ppm، باقی مانده اندوتوکسین ≤ 10EU/mg، بدون فعالیت پروتئاز، استریل، بدون مایکوپلاسما
کاربرد
پلاسمید را هضم کنید تا یک قطعه DNA خطی شده در انتهای پلی (A/T/C/G) تهیه شود.
الگوی پلاسمید را قبل از رونویسی آزمایشگاهی خطی کنید.
هضم محدود;
تعریف واحد
یک واحد به عنوان مقدار آنزیم مورد نیاز برای هضم 1 میکروگرم DNA کنترل داخلی در 1 ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد در حجم کل واکنش 50 میکرولیتر تعریف می شود.
حمل و نقل و ذخیره سازی
حمل و نقل:زیر 15- درجه سانتی گراد ارسال می شود
ذخیره سازی:در دمای -25-~15 درجه سانتی گراد نگهداری شود
زندگی مجدد آزمایشی توصیه شده:1 سال