2×PCR Super Mix (با رنگ)
2× PCR Master Mix حاوی Taq DNA Polymerase، dNTPs و سایر اجزای مورد نیاز PCR است.Master Mix به مدت 3 ماه در دمای 4 درجه سانتیگراد با تثبیت کننده های سفارشی ما پایدار است.محلول پیش مخلوط برای PCR معمولی بهینه شده و با افزودن الگوی DNA و پرایمرها آماده استفاده است.محصولات PCR را می توان مستقیماً برای الکتروفورز با رنگ بروموفنل آبی از پیش بارگذاری شده بارگذاری کرد.محصولات تقویت شده حاوی برجستگی 3 '-dA هستند و می توانند به راحتی در وکتور T کلون شوند.2×PCR Master Mix روش PCR را ساده کرده و آلودگی را کاهش می دهد.
شرایط نگهداری
محصولات باید به مدت 2 سال در دمای -25-~-15 درجه سانتیگراد نگهداری شوند.
مشخصات فنی
| وفاداری (در مقابل طاق) | 1× |
| شروع داغ | No |
| برآمدگی | 3 '-A |
| پلیمراز | Taq DNA پلیمراز |
| فرمت واکنش | سوپر میکس یا مستر میکس |
| سرعت واکنش | استاندارد |
| نوع محصول | PCR Master Mix (2x) |
دستورالعمل ها
1.سیستم واکنش
| اجزاء | جلد(μL) |
| DNA الگو | مناسب |
| پرایمر 1 (10 میکرومول در لیتر) | 2 |
| پرایمر 2 (10 میکرومول در لیتر) | 2 |
| 2× PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | تا 50 |
2.پروتکل تقویت
| مراحل چرخه | دما (درجه سانتیگراد) | زمان | چرخه ها |
| دناتوراسیون اولیه | 94 | 5 دقیقه | 1 |
| دناتوره سازی | 94 | 30 ثانیه | 35 |
| آنیل کردن | 50-60 | 30 ثانیه | |
| افزونه | 72 | 30-60 ثانیه در کیلوبایت | |
| تمدید نهایی | 72 | 10 دقیقه | 1 |
توجه داشته باشید:
1) استفاده از الگو: 50-200 نانوگرم DNA ژنومی.0.1-10ng DNA پلاسمید.
2) Mg2+غلظت: این محصول حاوی 3 میلی مولار MgCl2 است که برای اکثر واکنش های PCR مناسب است.
3) دمای بازپخت: لطفاً به مقدار نظری Tm پرایمرها مراجعه کنید.دمای بازپخت را می توان 2-5 درجه سانتیگراد کمتر از مقدار تئوری پرایمر تنظیم کرد.
4) زمان گسترش: برای شناسایی مولکولی 30 sec/kb توصیه می شود.برای شبیه سازی ژن، 60 sec/kb توصیه می شود.
یادداشت
1.محصولات PCR با 2× PCR Master Mix برای الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید مناسب نیستند.
2.برای ایمنی و سلامتی خود، لطفا از کت های آزمایشگاهی و دستکش های یکبار مصرف برای عمل استفاده کنید.
3.این فقط برای استفاده تحقیقاتی استفاده می شود!
